DMEM(Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基)是一種廣泛使用的基礎培養(yǎng)基,可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長。已經(jīng)在DMEM中培養(yǎng)成功的細胞包括原代成纖維細胞、神經(jīng)元、膠質(zhì)細胞、HUVEC、平滑肌細胞,以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等細胞系。針對廣泛的細胞培養(yǎng)應用,提供了多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基。使用培養(yǎng)基選擇工具查找適合的配方。
低糖培養(yǎng)基的適用場景:
細胞類型:原代腫瘤細胞、貼壁依賴性強的上皮細胞、單克隆抗體融合實驗。
研究領域:糖代謝機制、糖尿病模型構建、疫苗生產(chǎn)。
判斷細胞適應低糖環(huán)境的核心指標:
代謝活性變化:
糖酵解抑制:低糖環(huán)境下,若細胞通過增強磷酸戊糖途徑或谷氨酰胺代謝維持能量供應,表明其適應能力較強。
乳酸積累減少:低糖培養(yǎng)基中乳酸產(chǎn)量降低40%以上,提示細胞代謝轉(zhuǎn)向更高效途徑。
增殖與周期調(diào)控:
生長速率:適應低糖的細胞在低糖酸性條件下S期比例恢復,接近正常培養(yǎng)水平。
周期阻滯緩解:通過流式細胞術檢測,若G2期細胞比例下降且增殖標志物表達穩(wěn)定,說明細胞已適應。
分子標志物檢測:
c-Myc通路激活:c-Myc及其下游基因(ASCT2、GLS、PPAT)表達上調(diào),驅(qū)動谷氨酰胺代謝和核苷酸合成。
凋亡抑制:BAK/BAX蛋白活性降低,細胞凋亡信號減弱(如癌細胞通過此機制逃逸化療殺傷)。